齐乐娱乐Logo
热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜
现在位置首页>技术资料首页>产品信息>选购指南>必拓生物大肠杆菌菌株一览表,附菌株保存及复苏方法

必拓生物大肠杆菌菌株一览表,附菌株保存及复苏方法

弘业新创抗体技术股份有限公司2018年1月12日 15:40 点击:91


克隆宿主菌一览表
名称产品说明货号价格
Top10          克隆宿主S01001500
DH5α               克隆宿主                                S01002 500 
GM3819  去甲基化克隆宿主                            S01003500  
 
表达宿主菌一览表
名称产品说明货号价格
BL21(DE3)常规T7启动子载体表达宿主S02001500
BL21(DE3)Star增强mRNA稳定性,提高表达量S020021000
BLR(DE3)增强质粒稳定性,提高表达量S02003600
BLR(DE3)pLysS增强质粒稳定性,提高表达量;
减少本底表达
S02004800
BL21trxB(DE3)提供胞内蛋白二硫键形成环境S02005800
BL21trxB(DE3)pLysS提供胞内蛋白二硫键形成环境,
减少本底表达
S02006900
OrigamiB(DE3)提供胞内蛋白二硫键形成的最优环境S02007900
OrigamiB(DE3)pLysS提供胞内蛋白二硫键形成的最优环境,
减少本底表达
S020081000
Rosetta(DE3)提高含稀有密码子蛋白表达量S02009800
Rosetta2(DE3)提高含稀有密码子蛋白表达量S020101000
BSR(DE3)增强mRNA稳定性,提高表达量;
提高含稀有密码子表达
S020111500
M15配合pQE系列载体宿主S02014500

其它宿主菌一览表
名称产品说明货号价格
TG1               琥珀突变(TAG)抑制宿主;
生长迅速,也可用作表达宿主            
S03001500  
HB2151噬菌体抗体库用宿主S03002500
XL-Blue噬菌体抗体库用宿主S03003500
ER2738噬菌体繁殖宿主S03004500



问:必拓®大肠杆菌菌株以什么形态提供给客户更好呢?
答:一般菌种保存形态是甘油菌。但甘油保存菌容易污染,运输也不方便,因此,我们在给客户寄送菌种时,提倡寄送穿刺培养菌。因为穿刺菌在4℃下可保存数个月,并且不容易污染,便于运送。(注:夏天运输时一定要用冰盒冰袋)

问:如何制作穿刺菌?
答:制作穿刺菌时,可在1.5ml的Tube管中加入琼脂培养基(半固体),把菌体用牙签穿刺于琼脂培养基中,37℃ 培养一个晚上后便可使用。

问:客户收到穿刺菌后该如何储存? 
答:如短期保存(1个月内),可直接置于4℃保存;如长期保存,建议从穿刺菌划线后,挑取单菌落,接种在液体培养基中,做成甘油菌,置于-80℃保存。如需备份,也需要重新制备甘油菌,-80℃保存。

问:如何做甘油菌?
从菌种平板挑取单菌落,接种至液体培养基(按需要加入抗生素)中,培养过夜或培养至对数中期,取适量菌液于小管中,加入终浓度为10%-20%的灭菌甘油,混匀后可直接置于-80℃保存。

问:如何从穿刺菌中复苏细菌?
答:穿刺菌来源于单菌落,建议客户收到穿刺菌后,请先在LB平板上划线,然后挑取一个新鲜的单菌落于LB液体培养基中进行培养即可。
具体操作如下:取一个干净的移液器枪头,沿着穿刺管中淡黄色的大肠杆菌生长线插入,来回反复操作几次,每次都轻微改变枪头的方向,以尽可能的增加枪头与菌的接触面。将沾了菌的枪头在的LB平板上划线。将平板置于37℃培养箱中过夜培养。次日从LB平板上挑取一个单菌落接种到LB液体培养基中,37℃摇床过夜培养。

注:如果是含有载体的穿刺菌,则需用含有相应抗生素(载体的抗性基因)的LB平板和液体培养基,复苏菌种后直接提质粒即可。
附:抗生素使用浓度
氨苄青霉素(Ampicillin):100 μg/ml
卡那霉素(Kanamycin):50 μg/ml
氯霉素(Chloramphenicol):17-34 μg/ml
四环素(Tetracycline):5-12.5 μg/ml
链霉素(Streptomycin):50 μg/ml
(根据质粒拷贝数的高低,抗生素使用浓度可以适当调整 )


问:是否可以直接将穿刺菌接种到LB液体培养基中培养复苏菌种?
答:虽然穿刺菌中的大多数细菌细胞在遗传上应该是相同的,但是偶然情况下,会存在个别隐藏的突变细菌。如果您只是简单的从混合菌落中挑选了一团细菌,然后在液体培养基中培养,那么突变的细菌就有可能会接管整个培养物,从而影响您的实验。而每个单独的菌落就是单克隆,即它们在遗传学上是相同的因此通过划线挑取单克隆的方法可以很好的避免这种问题。

咨询热线:18511779761  QQ:2711569587

(来源: 弘业新创抗体技术股份有限公司


全年征稿 / 资讯合作 联系邮箱:kefu@labbase.net

版权与免责声明

  1. 凡本网注明“来源:齐乐娱乐”的所有作品,版权均属于齐乐娱乐,转载请必须注明齐乐娱乐, http://www.labbase.net,违反者本网将追究相关法律责任。
  2. 本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
  3. 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
齐乐娱乐